安捷倫1260液相色譜儀是一種高效的分離和分析技術(shù)，通過(guò)在固定相（色譜柱）和流動(dòng)相（溶劑）之間相互作用，實(shí)現對混合物中成分的分離和檢測。HPLC在各種領(lǐng)域的科學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)中發(fā)揮著(zhù)重要作用。其基本原理是利用化合物在固定相（通常是填充在色譜柱中的吸附劑）和流動(dòng)相（溶劑）之間的分配系數差異，實(shí)現化合物的分離。樣品混合物在色譜柱中受到不同程度的吸附和解吸作用，從而在柱中分離成各個(gè)成分。檢測器檢測這些分離的化合物，并生成相應的信號。
1、流動(dòng)相準備
溶劑純度：使用的溶劑必須達到色譜純（LC）級別。
過(guò)濾脫氣：所有溶劑在使用前需經(jīng)過(guò)0.45微米濾膜過(guò)濾，并通過(guò)超聲脫氣10-20分鐘。這有助于去除雜質(zhì)和溶解的氣體，防止氣泡影響泵和檢測器的性能。
溶劑連接：確保A管連接有機相，B管連接水相，并且溶劑完q浸沒(méi)吸濾頭。
2、設備操作
開(kāi)機連接：打開(kāi)HPLC工作站（包括計算機軟件和色譜儀），連接好流動(dòng)相管道和檢測系統。
沖洗泵閥：如果長(cháng)時(shí)間未用或更換新的流動(dòng)相，需先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵時(shí)，直接在泵的出水口用針頭抽取溶劑；沖洗進(jìn)樣閥時(shí)，在控制界面中點(diǎn)擊purge后再點(diǎn)擊start，速度不要超過(guò)10 ml/min。
調節流量：初次使用新流動(dòng)相時(shí)先測試壓力，流速不宜過(guò)大，通常不超過(guò)2000 psi，然后選擇合適的流速并走基線(xiàn)，觀(guān)察基線(xiàn)情況。
3、方法設計
設定方法：在控制界面選擇或創(chuàng )建合適的走樣方法，包括進(jìn)樣前的穩流、基線(xiàn)歸零、進(jìn)樣閥的loading-inject轉換和走樣時(shí)間。
樣品處理：所有樣品需經(jīng)過(guò)濾后才可進(jìn)樣。進(jìn)樣后按照設定的方法進(jìn)行分析，并在完成后記錄數據和做標記[postrun]，最后再用基線(xiàn)方法洗掉剩余物。
4、維護保養
環(huán)境條件：保持儀器工作環(huán)境干凈、溫度適宜，避免振動(dòng)和陽(yáng)光直射。
定期檢查：定期檢查和維護泵、檢測器及管路，確保沒(méi)有泄漏或堵塞。
清洗部件：定期清洗泵、閥門(mén)和檢測器等關(guān)鍵部件，保持其清潔無(wú)污染。
